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實驗室,顧名思義是進行實驗的場所,諸多科技的進步無不源于此。它對科學研究有著重要的意義,對科技發(fā)展起著非常重要的使用。在一些重要的科研領域,我們國家設有專門的實驗室,謂之國家重點實驗室。這些實驗室信托單位以中科院各研究所、重點大學為主體,開展基礎研究以及探索科學技術前沿。
在許多實驗室,如蛋白組學、藥物化學&分析、RNA&DNA研究、寡聚合物和肽、藥物代謝藥物研究等,為了得到有效樣品進行分析研究,必須進行一些前處理工作。常用的方法有以下幾種:
第一、 氣流吹蒸法。通常采用氮氣,因為氮氣是一種不活潑的氣體,可以起到隔絕氧氣的作用,防止氧化。將氮氣快速、連續(xù)、可控的吹到加熱樣品表面,實現(xiàn)大量樣品的快速濃縮。
優(yōu)點:
+揮發(fā)性溶劑濃縮速度很快;
+價格優(yōu)勢比較大;
存在的主要問題:
-樣品回收率低,容易掛壁;
-蒸汽在噴嘴處冷凝,容易造成交叉污染;
-溶劑不能回收,容易污染環(huán)境,不環(huán)保,須在通風櫥內(nèi)使用;
-對于高沸點或者難揮發(fā)的溶劑,速度會非常慢;
-需要不斷消耗氮氣,亦是一種損耗;
-像石油醚等高易燃物質不適宜使用。
第二、旋轉蒸發(fā)濃縮,在真空條件下,恒溫加熱,使蒸發(fā)瓶恒速旋轉,增大蒸發(fā)面積,真空泵的作用下,蒸發(fā)瓶處于負壓狀態(tài),溶劑在瓶壁形成大面積薄膜,高效擴散蒸發(fā)。蒸發(fā)的溶劑經(jīng)冷凝器冷卻,回流于接收瓶中,大大提高蒸發(fā)效率。
優(yōu)點:
+處理單一樣品量大;
+揮發(fā)性溶劑速度很快,特別適用對高溫容易分解變性的生物制品的濃縮提純;
缺點:
-單次只能處理一個樣品;
-手動操作;
-易爆沸,危險性高;
-微量樣品不能處理。
第三、 凍干濃縮法,由物理學可知,水有三相,O點為三相共點,OA為冰的融解點。根據(jù)壓力減小、沸點下降的原理,只要壓力在三相點壓力之下,物料中的水分則可從水不經(jīng)過液相而直接升華為水汽。根據(jù)這個原理,就可以先將濕原料凍結至冰點之下,使原料中的水分變?yōu)楣虘B(tài)冰,然后在適當?shù)恼婵窄h(huán)境下,將冰直接轉化為蒸汽而除去,再用真空系統(tǒng)中的水汽凝結器將水蒸汽冷凝,從而使物料得到干燥。
優(yōu)點:
+最終樣品為絨狀,干燥(粉末);
+可凍干固體;
缺點:
-速度非常慢;
-溶劑的樣品形式有限制;
-有機溶劑類不適合:
-凍干起泡。
第四、真空離心濃縮。綜合利用離心力、加熱和外接真空泵提供的真空作用來進行溶劑蒸發(fā),并通過超低溫的冷阱捕捉溶劑,從而將溶劑快速蒸發(fā)達到濃縮或干燥樣品的目的。離心濃縮后的樣品可方便地用于各種定性和定量分析。
優(yōu)點:
+樣品低溫:避免樣本丟失、變性、活性下降、氧化;
+高通量:同時可處理幾十個樣品且可避免交叉污染;
+環(huán)保:有冷阱溶劑回收,解放通風櫥;
+樣品得到率非常高;
+操作簡便,一健啟動;
+無需耗材;
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