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蛋白質(zhì)組學(xué)樣品高效濃縮技術(shù)的優(yōu)化與性能評(píng)估

更新時(shí)間:2025-07-11    瀏覽量:20

     蛋白質(zhì)組學(xué)(Proteomics)是后基因組時(shí)代的重要研究領(lǐng)域,旨在全面研究生物體內(nèi)所有蛋白質(zhì)的表達(dá)、結(jié)構(gòu)、功能、修飾及其相互作用。它不僅是基因組學(xué)的補(bǔ)充,更是理解生命活動(dòng)分子機(jī)制的核心手段,它是一種基于質(zhì)譜檢測(cè)的分析技術(shù)。

     該方法的大致過程是將從樣本中提取到的蛋白水解/酶解為肽段,然后進(jìn)行質(zhì)譜檢測(cè),根據(jù)肽段的鑒定和定量信息推測(cè)出其對(duì)應(yīng)蛋白的鑒定和定量結(jié)果。因此,目前的蛋白質(zhì)組學(xué)樣品制備流程,通常均會(huì)包括蛋白提取、蛋白酶解和肽段除鹽三個(gè)步驟。

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一、蛋白提?。?/p>

     蛋白質(zhì)提取旨在從含多種干擾物的生物樣本中釋放并純化蛋白質(zhì)。通過裂解液(含SDS、尿素等去垢劑)破壞樣本結(jié)構(gòu),結(jié)合超聲/研磨促進(jìn)蛋白溶解。針對(duì)雜質(zhì)或SDS干擾,可采用沉淀/復(fù)溶等方法純化。血漿需去除高豐度蛋白以提高檢測(cè)靈敏度。提取方法需適配后續(xù)分析需求。

二、蛋白酶解:

     蛋白質(zhì)是一類含有空間結(jié)構(gòu)的高分子化合物,在酶解前需要提前加入還原劑提高酶解效率。蛋白質(zhì)組學(xué)中常用胰蛋白酶進(jìn)行酶解處理,將蛋白酶解為適宜質(zhì)譜檢測(cè)的肽段長(zhǎng)度。

三、肽段除鹽:

     蛋白樣本前處理通常是在含鹽緩沖體系中進(jìn)行,目前常使用層析法,主要原理是SDB或C18材質(zhì)的層析柱可以結(jié)合待檢測(cè)肽段,從而達(dá)到分離和純化肽段的目的。脫鹽后的肽段通過真空離心濃縮儀抽干后,即可于4℃或-20℃短期保存,等待后續(xù)的質(zhì)譜檢測(cè)。

四、如何建立一個(gè)高效的樣品制備流程?

     在蛋白提取和酶解階段,越來越多的公司采用一體式自動(dòng)化前處理儀器。如北京青蓮百奧生物有限公司生產(chǎn)的前處理機(jī)器人,可同時(shí)處理 1-96 個(gè)樣本。酶解后的樣品放入離心濃縮儀干燥后進(jìn)質(zhì)譜檢測(cè)。離心濃縮儀以其高通量、快速、避免交叉污染等優(yōu)勢(shì),迅速成為蛋白質(zhì)組學(xué)測(cè)試中的必備儀器。

     北京吉艾姆儀器有限公司作為國(guó)產(chǎn)離心濃縮儀行業(yè)領(lǐng)跑者,打破國(guó)外濃縮儀壟斷局面,產(chǎn)品性能達(dá)到國(guó)際水平。吉艾姆作為青蓮百奧長(zhǎng)期友好合作伙伴,其 CV200離心濃縮儀和 CV600 冷凍離心濃縮儀已服務(wù)多年。以其穩(wěn)定的性能和專業(yè)周到的售后部門,受到客戶的信賴。

     為提高濃縮速率,加大檢測(cè)通量。吉艾姆憑借近十年的專業(yè)知識(shí)及研發(fā)經(jīng)驗(yàn),設(shè)計(jì)出更緊湊、功能更強(qiáng)大的金剛 1000 系列—全自動(dòng)溶劑蒸發(fā)工作站。

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金剛1000溶劑蒸發(fā)工作站

五、試用評(píng)價(jià):

青蓮百奧作為蛋白組學(xué)方向試用者,使用 3 周后給出以下使用評(píng)價(jià):

1)干燥時(shí)間縮短一倍以上;

2)一體機(jī)占臺(tái)面小,液晶屏操作簡(jiǎn)單;

3)保存?zhèn)€性濃縮方案,可一鍵啟動(dòng)。

六、金剛 1000 系列溶劑蒸發(fā)工作站特點(diǎn):

? 內(nèi)置雙高功率紅外燈,加快濃縮速率

? 一體式機(jī)型,占地面積小

? 全方位樣品防護(hù):防暴沸技術(shù)協(xié)同非接觸式控溫,防止樣品暴沸及過熱分解

? 高通量:多樣本平行處理

? 高效去除 DMF 和 DMSO 等高沸點(diǎn)溶劑

? 智能化蒸發(fā)系統(tǒng):一鍵啟動(dòng),數(shù)據(jù)全過程記錄。

? 樣品回收率高達(dá) 95%以上。

? 適用于組學(xué)研究、藥物化學(xué)、天然產(chǎn)物發(fā)現(xiàn)、分析及檢測(cè)等樣品前處理需要。

未來,吉艾姆公司將深入踐行“持續(xù)創(chuàng)新、提升服務(wù)理念”奮力成為具有國(guó)際競(jìng)爭(zhēng)力的真空濃縮儀設(shè)備制造供應(yīng)商。金剛 1000 溶劑蒸發(fā)工作站免費(fèi)試用中,歡迎咨詢。


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